WWOX基因对人急性淋巴细胞性白血病细胞CCRF-CEM细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:研究WWOX基因对人急性淋巴细胞性白血病细胞CCRF-CEM细胞凋亡及细胞周期的影响及分子机制。方法:体外培养CCRF-CRM细胞系，将WWOX基因转染入CCRF-CEM细胞，建立高表达WWOX的CCRF-CEM细胞，流式细胞仪法测定CCRF-CEM细胞的细胞周期和凋亡，Western blot法测定WWOX基因、细胞周期和凋亡相关因子的蛋白表达，qRT-PCR法测定caspase-3的mRNA表达。结果:与对照组和空白质粒组相比，转染入WWOX的CCRF-CEM细胞的WWOX蛋白表达显著增加，G0/G1期的细胞比例显著增加，凋亡细胞比例显著增加；CCRF-CEM细胞中cyclin D1、cyclin E、CDK2的蛋白表达显著降低而Wnt-5α和JNK的蛋白表达显著增加，caspase-3的mRNA表达促进CCRF-CEM细胞的凋亡。结论:WWOX基因在急性淋巴细胞性白血病CCRF-CEM细胞中发挥抑癌基因作用，可以有效促进细胞凋亡并抑制细胞周期进程。     

微小RNA-148a-3p靶向调控MAP3K9表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-148a-3p（miR-148a-3p）对丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9（MAP3K9）的靶向调控作用及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 向对数生长期胃癌细胞株MGC-803转染miR-148a-3p模拟物（mimics组）和阴性对照（NC组），以未转染的MGC-803细胞为对照组；采用实时定量PCR（QPCR）检测各组miR-148a-3p水平以评价转染效率，MTT法检测各组细胞增殖能力，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，分别采用QPCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3及MAP3K9 mRNA和蛋白水平，同时采用双荧光素酶报告实验验证miR-148a-3p与MAP3K9的靶向作用关系。结果 QPCR结果显示，对照组、NC组和mimics组的miR-148a-3p水平分别为1.021±0.123、1.087±0.196和2.854±0.368，与对照组和NC组比较，mimics组的miR-148a-3p水平升高（P＜0.05）。mimics组MGC-803细胞的增殖活力较其余两组减弱（P＜0.05）。mimics组MGC-803细胞凋亡率为（15.2±1.6）％，高于对照组的（3.5±0.9％）％和NC组的（4.5±1.1）％，差异具有统计学意义（P＜0.05）。与对照组和NC组比较，mimics组的MAP3K9和Bcl-2的mRNA和蛋白水平均下调，而Bax和caspase-3的mRNA和蛋白水平均上调（P＜0.05）；双荧光素酶报告实验证实MAP3K9是miR-148a-3p的直接作用靶点。结论 MiR-148a-3p可抑制胃癌细胞MGC-803的增殖并诱导其凋亡，可能通过靶向MAP3K9来发挥抑癌作用，调控miR-148a-3p／MAP3K9轴在胃癌防治中有一定应用前景。     

血清癌胚抗原与晚期肺非小细胞鳞癌化疗疗效的关系

目的：探讨血清癌胚抗原（CEA）变化与晚期肺非小细胞鳞癌化疗疗效的关系。方法回顾性分析107例晚期肺非小细胞鳞癌（non-small cell lung carcinoma,NSCLC）患者的临床资料,符合入组标准的患者60例,按照RECIST评价标准,分为病情进展组（disease progression,PD组）、稳定组（disease stability,SD组）和病情好转（partial remission,PR及complete remission,CR）组。分别采用吉西他滨（gemcitabine,GP组）、紫杉醇（paclitaxel,PTX）、多西他赛进行治疗。统计分析3组患者血清癌胚抗原变化与NSCLC化疗疗效之间的关系。结果（1）GP组、PTX组及多西他赛组临床缓解率分别为50.00%、65.00%及80.00%（;2（）PR及CR）组、SD组及PD组CEA变化水平升高例数分别为9、11及6例,降低例数分别为9、12及13例（;3）血清癌胚抗原的变化与NSCLC化疗疗效无显著相关性。结论血清癌胚抗原的变化与NSCLC化疗疗效无显著相关,差异无统计学意义,不能作为晚期NSCLC化疗疗效的评判指标。     

食管癌根治性放疗191例疗效分析

目的:分析191例食管癌根治性放疗患者的长期疗效及其预后影响因素。方法:2009年5月至2012年5月首程接受根治性放疗的191例食管癌患者,依据《非手术治疗食管癌的临床分期标准(草案)》分为各个亚组,观察其近期疗效、生存率、局控率、治疗失败原因、死亡原因,用Kaplan-Meier法计算生存率及局控率,Log-rank法进行单因素预后分析,Cox法进行多因素预后分析。结果:随访率为99.5%。随访时间满2 a者61例,满3 a者24例。全组1、2、3 a局部控制率分别为83.2%、62.3%、48.7%,生存率分别为64.9%、36.6%、30.2%,中位生存期16个月。单因素分析显示病变部位、病变长度、最大病变横径、临近组织是否受侵、T分期、N分期、TNM分期与预后密切相关(χ2=7.881、12.756、5.491、9.972、18.825、11.739和14.353,P<0.05),Cox模型多因素预后分析结果显示T、N分期为影响总生存的因素(χ2=5.080、6.018,P<0.05)。结论:分期早晚仍是食管癌根治性放疗的经典预后影响因素,非手术治疗分期对判断预后有参考价值,治疗失败的主要原因是局部复发和未控,其次是远处转移。     

基于基因表达综合数据库筛选调控急性T淋巴细胞白血病超高剂量率放疗敏感性的枢纽基因

目的 通过生物信息学方法对基因表达综合(GEO)数据库中超高剂量率(FLASH)放疗的数据进行分析,寻找参与调控急性T淋巴细胞白血病FLASH放疗敏感性的枢纽(Hub)基因。方法 从GEO数据库中下载和提取接受FLASH放疗恶性肿瘤基因表达谱芯片数据,采用R软件进行差异基因的筛选,并对这些基因进行生物学功能、信号传导通路等分析。通过STRING在线软件分析差异基因的蛋白质相互作用(PPI) 网络,Cytoscape插件筛选Hub基因。最后,应用肿瘤基因组图谱(TCGA)和GTEx数据库验证Hub基因在急性T淋巴细胞白血病中的表达情况。结果 自GEO数据库中获得GSE100718芯片数据,共有12 800个基因与急性T淋巴细胞白血病放疗敏感性相关。选择表达量显著改变的61个基因进行进一步分析,这些基因参与代谢、应激反应、免疫应答等生物学过程。主要涉及氧化磷酸化、未折叠蛋白应答、脂质代谢等信号转导通路。通过PPI分析筛选出的Hub基因及后续验证表明HSPA5及SCD参与调控FLASH放疗敏感性,且在合并TRD/LMO2融合基因的急性T淋巴细胞白血病中显著高表达。结论 通过生物信息学分析可以有效筛选出调控FLASH放疗敏感性的Hub基因,基因表达谱可用于指导肿瘤患者分层以实现精准放疗。     

局部介入联合卡瑞利珠单抗与阿帕替尼治疗转移性软组织肉瘤的安全性和有效性

【摘要】 目的 探讨局部介入联合卡瑞利珠单抗与阿帕替尼治疗转移性软组织肉瘤的安全性与有效性。方法 选取2019年3月至2020年6月收治的15例转移性软组织肉瘤患者,于局部介入后行卡瑞利珠单抗联合阿帕替尼治疗,采用Kaplan- Meier法绘制生存曲线,统计患者中位总生存期（mOS）、中位无进展生存期（mPFS）。临床疗效评估根据改良实体瘤评价标准（mRECIST）,计算客观缓解率（ORR ）、临床受益率（CBR）、临床获益持续时间（DoCB）并随访观察安全性。结果 15例患者中1例CR、5例PR、7例SD、2例PD,mOS为14.9个月、mPFS为7.8个月、中位DoCB为8.4个月,ORR为40%,CBR为86.7%。Ⅲ级不良反应为贫血2例、高血压2例和白细胞减少1例,未观察到Ⅳ级不良反应。 结论 局部介入联合卡瑞利珠单抗与阿帕替尼能够显著延长转移性软组织肉瘤患者的生存期,且安全可控。     

半野分段弧照射技术对乳腺癌放疗危及器官的保护作用

目的 利用半野的剂量分布特性和容积调强（VMAT）技术的特点,探索一种可以更好保护肺和心脏的新技术。方法 采用三维水箱测量对称野及半野的射野边缘剂量分布,并比较分析各自特征。回顾性选取50例左侧乳腺癌术后放疗患者,保乳术和根治术各25例,处方剂量50 Gy/25次,基于RayStation计划系统,分别采用对称野连续弧VMAT技术和半野分段弧VMAT技术进行计划设计,比较和分析靶区的剂量适合度、治疗效率,以及心脏、肺等危及器官的各种剂量数据。结果 半野的辐射野大小在水模内不随深度增加而增加,对称野则因张角因素射野逐步变大,30 cm处增大到约2 cm,而且半野的射野外剂量低于对称野,差值愈近射野边缘愈明显。与对称野连续弧计划相比,半野段弧VMAT计划能显著改善肺和心脏的受照射剂量,差异有统计学意义（t=-4.11、-4.42,P=0.00）,其中心脏整体结构的V₅、V₃₀、D_mean均值减少为52.5%、65.5%、47%,与靶区关系紧密的左侧冠状动脉前降支降幅超过20%,患侧肺V₅、V₁₀、V₂₀、D_mean的均值分别减少21.6%、24.8%、25.0%、23.2%,其他正常器官剂量均值,半野段弧计划同样优于连续弧计划。结论 对于乳腺癌放疗,半野与VMAT结合可以充分发挥半野和VMAT的优势,显著改善心脏、患侧肺、健侧乳腺等危及器官的受照射剂量。     

罗氏标本前处理系统离心参数的优化

目的 优化标本前处理系统离心参数,降低标本凝集率,提高标本前处理系统的标本处理效率.方法 对比低温离心和常温离心的标本凝集率;对比低离心力长时间离心和高离心力短时间离心标本凝集率.结果 设置为离心力1822×g、离心时间5 min时,20℃离心标本凝集率低于10℃离心标本凝集率[(3.44±0.24)％vs.(4.70±0.44)％,P<0.05];设置为离心力4100×g、离心时间5 min的标本凝集率低于设置离心力1822×g、时间10 min的标本凝集率[(0.30±0.03)％vs.(2.88±0.27)％,P<0.05].电化学发光检测项目癌胚抗原(CEA)、神经元特异烯醇化酶(NSE)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的标本分别经1822×g和4100×g离心前处理后进行检测,对检测结果进行比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 对电化学发光检测而言,常温的离心效果优于低温离心,高离心力短时间离心比低离心力长时间离心的标本凝集率低.标本前处理系统设置合理的离心参数能够节省标本预处理时间,提高检测效率.     

双向调控Cox-2表达对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 探讨上调和下调Cox-2基因表达对食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法 构建针对Cox-2基因的siRNA载体及Cox-2基因真核表达载体,通过脂质体转染技术将其转入食管癌EC9706细胞,G418筛选得到稳定转染细胞系。荧光定量RT-PCR和Western blot分别检测细胞中Cox-2 mRNA和Cox-2蛋白表达水平;裸鼠移植瘤实验检测上调和下调Cox-2表达联合X射线照射对食管癌的生长抑制作用。结果 Cox-2下调组食管癌EC9706细胞内Cox-2基因表达明显降低,Cox-2上调组明显升高。Cox-2下调组裸鼠移植瘤平均体积明显小于对照组(F=34.26,P<0.05);Cox-2上调组的瘤体平均体积大于对照组(F=26.38,P<0.05)。20 Gy γ射线照射后Cox-2下调组瘤体平均体积较照射前明显减小(F=16.35,P<0.05);而上调组裸鼠皮下种植瘤平均体积较照射前无明显变化。结论 下调Cox-2表达能抑制人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的生长,增强瘤体的放射敏感性,上调Cox-2表达则使肿瘤辐射抗拒。